1967-Di Luzio, primele dovezi ale implicarii SRO in leziunile tisulare-culturi de hepatocite au utilizat ca agenti prooxidanti CCl4, excesul de etanol sau fier. ficatul contine: cantitati mari de antioxidanti : SOD, CAT, GSH-Px, GSH, vit.E, ceruloplasmina sisteme care in conditii pro-oxidative devin surse de SRO: XO, enzime oxidative microzomale, cel.Kupffer x5v24vi
Formarea SRO in ficat: eliberarea din celulele fagocitare activate (cK) eliberrarea in leziunile de ischemie/ reperfuzie eliberarea din sistemele enzimelor oxidative microzomale (MEOS)
Eliberarea SRO de catre celulele fagocitare (macrofage hepatice activate) stimularea cK activate (C.parvum) prin administrare de endotoxina la sobolan, creste nivelul seric al MDA corelat cu gradul necrozei hepatocitare pretratamentul cu SOD reduce mortalitatea si extinderea leziunilor in vitro cK izolate, activate cu galactozamina elibereaza masiv SRO (Funatsu-1991) la om: stimularea cK prin endotoxinele intestinale,LPS bacteriene>in ciroza dezvoltarea EH, obstructii biliare extrahepatice proliferarea cK in hepatite fulminante, hepatite cronice active, hepatite toxice

Eliberarea SRO in leziunile hepatice din ischemie/reperfuzie cresterea MDA, scaderea GSH din eritrocite in hepatita ischemica la om
in ficatul transplantat MDA si protein-aldehidele din eritrocite cresc paralel cu citoliza si colestaza> SO se coreleaza cu colestaza adaosul de AO (GSH, alopurinol) in solutia de conservare creste rezistenta ficatului la ischemia prin congelare si dupa reimplantare
Eliberarea SRO din sistemul MEOS metabolizarea xenobioticelor in MEOS determina leziuni hepatocitare prin:
-legare covalenta a metabolitilor de macromoleculele celulare cu perturbarea functiilor celulare
-transferul de electroni pe oxigen in cursul metabolizarii sau de catre metabolitii xenobiotici cu formare de SRO acetaminofen, HIN, hidralazina, alfametil-DOPA, nirofurantoin, clorpromazina, haloalcani, paraquat, alcool, aflatoxine desferoxamina, NAC inhiba toxicitatea la acetaminofen
SRO si fibrogeneza hepatica sinteza de colagen este aproape constant precedata de inflamatie generarea de O2- este o componenta majora a inflamatiei > stimuleaza prolin-hidroxilaza si sinteza de colagen administrarea de SOD reduce activitatea prolin-hidroxilazei
Lipoperoxidarea in patologia hepatica
Lpx-modifica structura si functia membranelor, moduleaza extinderea agresiunii SRO prin “auto-oxidarea PUFA”
Lpx. in intoxicatia cu CCl4, cloroform, halotan, paracetamol, excesul de Fe, etanol
Tsukamoto 1993-intensificarea lipoperoxidarii: lezeaza membranele celulare creste producerea de colagen (suplimentarea cu vit.E reduce fibroza la CCl4), MDA si 4-HNE are efect procarcinogen
NO in patologia hepatica
in hepatocite, c.endoteliale hepatice-cantitati mari de iNOS stimulata de procesele inflamatorii
in ciroza hepatica la om-nivele crescute de endotoxine > stimuleaza sinteza NO > vasodilatatie si circulatie hiperdinamica
NO modulator al chemotactismului, adeziunii PMN, reglator al proliferarii limfocitare
in hepatite autoimune sau virale
NO+O2- > peroxinitrit cu rol in Lpx.
NO rol demonstrat in: inflamatie ischemia hepatica hepatocarcinogeneza: formare de nitozamine, dezaminarea bazelor din ADN si leziuni oxidative (Bartsch-1992)

SO in hepatopatiile alcoolice rolul SRO in leziunile induse de alcool si efectul protector al AO in steatoza la sobolan -Di Luzio 1963
SO produs de etanol (intoxicatie ac. sau cr.) este cel mai sever in ficat cresterea Lpx. in cursul metabolizarii etanolului > efect fibrogenic sursele majore de formare a SRO in ficat prin expunere la etanol sunt: cresterea activitatii sistemelor celulare generatoare de SRO ( izoenzime P450, NADPH-cit.P450-reductaza, XO, cresterea ciclizarii redox etc.) cresterea generarii SRO dependente de fier (cresterea depozitarii Fe in ficat, cresterea eliberarii de Fe din depozite) scaderea AO celulari (GSH, SOD, CAT, vit.E, vit.A)
SO in hepatite toxice si medicamentoase intoxicatia cu CCl4
Lpx. in z.centrolobulara> citoliza intoxicatia cr.>fibroza, mutatii si carcinogeneza alti haloalcani halotanul >Lpx.(legare covalenta de membranele microzomale si cit.P450) compusi redox activi chinone: paraquat, diquat, aloxan > O2- si consumarea GSH adriamicina: O2- si Lpx. dependenta de Fe acetaminofenul: detoxificat prin conjugare cu GSH. In supradozaj > necroza hepatocitara, IHF alte hepatotoxice
HIN, hidralazina, clorpromazina, nitrofurantoinul, DDT, aflatoxine > eliberarea SRO
SO in boli metabolice si de stocaj hemocromatoza ereditara (idiopatica), hemosideroza secundara ( transfuzii, hepatopatii alcoolice, virale, PCT) supraincarcarea cu Fe > fibroza hepatica, activarea si incarcarea cu Fe a cK, actiune sinergica cu alte hepatotoxice (virus, alcool, xenobiotice) b.Wilson supraincarcarea cu Cu > intensificarea Lpx. in mitocondriile hepatice deficitul de ceruloplasmina favorizeaza depozitarea Cu liber in ficat si conversia XDH in XO cu formare de O2 SO in CBP si alte boli colestatice
CBP productie crescuta de O2- in celulele epiteliale ale ductelor biliare interlobulare > nivele crescute de MnSOD ictere obstructive cresterea Lpx. si deficit de vit.E prin consum in tesutul hepatic
SO in transplantul hepatic sursa majora de SRO in ischemia/reperfuzia hepatica este XO activarea cK in cursul reperfuziei > O2- si Lpx. tratament cu coenzima Q 10, NAC, alopurinol-inhiba Lpx adaos de alopurinol, vit.E, SOD, CAT, GSH in solutia de conservare
SO in bolile hepatice inflamatorii
in hepatitele virale acute, cronice active cresc Lpx. corelati cu nivelul bilirubinei prin activarea cK, sursa de SRO
Terapia antioxidanta in bolile hepatice
Enzime antioxidante hepatice
SOD
CuZnSOD-citoplasma; Mn SOD-mitocondrii scade: hepatite cr.active, ciroze nealcoolice
SOD-efecte antiinflamatoare, antifibrotice conjugati polimerici: SOD-PEG sau SOD-DIVEMA in tratamentul fibrozei hepatice
Enzime AO hepatice
CAT hem-enzima citoplasmatica scade: hepatite ac., cr. active, ciroze alcoolice si nealcoolice
GSH-Px reduce Lpx., H2O2 scade: in ciroze
AO hepatici neenzimatici
GSH rol major in protectia celulara ficatul: reglarea pool-ului circulant de GSH (90%) scade in ciroza hepatica, hepatopatii alcoolice administrarea SAMe corecteaza deficitul
Vitamina E
Tocoferolii-a, ß, d, ?- AO liposolubili care inhiba Lpx.la nivelul membranei celulare
?-tocoferol in dieta, a-tocoferol in tesuturi scade progresiv cu afectarea functiei hepatice in: hepatite colestatice, ciroze avansate, fibroza chistica interfereaza mecanismul molecular al fibrozei-scade in ciroza (cc.serica absoluta)-beneficii ? b.Wilson, hemocromatoza-scade paralel cu cresterea serica a Cu, Fe h.colestatice-malabsorbtia favorizeaza fibroza
Vit.A si ß-carotenul
ß-carotenul -mai eficient AO decat retinolul carotenoizii inhiba Lpx., oxidarea ac.arahidonic, interactioneaza cu vit.E vit.A-hepatotoxicitate intrinseca exacerbata de etanol
ß-carotenul este mai putin toxic (etanol ! )
Oligoelementele din compozitia enzimelor AO
Seleniul
in ficat, rinichi, pancreas actiune interconditionata cu vit.E
in sistemul epurator intracelular< GSH-Px scaderea serica se coreleaza cu reducerea parametrilor functionali hepatici deficitul combinat Se+vit.E corelat cu intensitatea activitatii (GPT,GOT,Lpx.) scade: hepatopatii alcoolice severe, CBP, alte ciroze
VHC codifica genele GSH-Px-Se dependente si scad Se gazdei->stimularea replicarii virale

Zincul intestinul si ficatul- reglatori esentiali ai absorbtiei si distributiei Zn
in ficat si sinteza metaloproteinelor-aport crescut de Zn-creste sinteza metalotioneinei deficit de Zn: hepatopatii alcoolice, EH din ciroza se administreaza Zn-sulfat, Zn-acetat, Zn-histidina b.Wilson-Zn creste cc.metalotioneinei-leaga si elimina excesul de Cu
Medicatia AO in bolile hepatice
SAMe sursa de cisteina pentru GSH hepatopatii colestatice, alcoolice, intoxicatie cu paracetamol s.Gilbert: imbunatatirea fluiditatii si functiei membranelor celulare encefalopatia portala: ameliorarea tulburarilor neurologice, efect antidepresiv
1200 mg/zi p.o.-ameliorarea citolizei

Polienil-fosfatidil-colina lecitina polinesaturata extrasa din boabe de soia previne Lpx. hepatica restabileste activitatea enzimelor inhiba CYP2E1 corecteaza depletia de FL hepatice antifibrotica-stimuleaza activit.colagenazei
in hepatopatii virale, alcoolice, autoimune ameliorare clinica si histologica
Lazaroizii
21-aminosteroizi citoprotectori fata de Lpx. dependenta de Fe compusul A (474500A) este un epurator mai eficient decat F sau G
Cianidanolul (Catergen) bioflavonoid epurator al SRO creste rezerva de ATP, stabilizeaza membranele lizozomale hepatite cronice si ciroze (?)
Silimarina
Silybum marianum, sec.IV i.Ch. silibinina+silidianina+ silicristina epurator activ SRO, stabilizator membranar inhiba Lpx.membranelor hepatocitare,microzomale, eritrocitare suprima leucotriena B4 din c.Kupffer blocheaza proliferarea CHS-reduce fibroza nu are efecte secundare hepatite toxice (CCl4, organofosforice, Amanita phalloides) si medicamentoase (paracetamol) hepatopatii alcoolice ciroze virale C la care IFN nu este recomandat (+/- UDCA)
Acidul-a lipoic
AO lipo si hidrosolubil forma redusa (DHLA) este donator de electroni care recicleaza alti AO (vit.C, E, GSH) chelator al metalelor-extrage Hg, As, Cu hepatopatii alcoolice hepatite toxice cu Amanita Phalloides i.v.
Inhibitorii iNOS
NO-oxidant inalt reactiv produs de celulele parenchimatoase si neparenchimatoase hepatice
Aminoguanidina-inhibitor selectiv al iNOS hepatite toxice la paracetamol, CCl4
Tacrolimus (FK 506)-inhiba iNOS din hepatocite, celulele m.netede vasculare, mezangiale renale previne rejetul de grefa in transplantul de organe
Corticosteroizii normalizeaza expresarea moleculelor de adeziune pe suprafata PMN->scade infiltratul hepatic si producerea de H2O2
in hepatopatiile etanolice
Tratamentul AO asociat in b.hepatice vit.C (AO extracelular) actioneaza impreuna cu tiolii, GSH, ac.dehidrolipoic economisind depozitele celulare de vit.E si rezervele de vit.E si ß-caroten din LDL generarea SRO are loc intracelular dar difuzeaza instantaneu transmembranal
AO au actiuni sinergice sau complementare practic se utilizeaza amestecuri de AO lipo si hidrosolubili
Ciroza virala C: ac.a-lipoic (600mg/zi) + Se-metionina (400mg/zi)+silimarina (900mg/zi)
Stresul oxidativ in bolile pancreasului
Pancreatita acuta
in pancreatita “ischemica” reperfuzia produce leziuni tisulare prin O2- (SOD are efect protector)
in pancreatita “chimica” si “mecanica” > Lpx. cu necroza tisulara, edem (SOD+CAT au efect protector) clinic: cantitati mari de produsi Lpx. in bila si tesut pencreatic+ scaderea vit.C in sange ( Bruce s.c. 1991) nivelul O2- este 7x fata de normal nivelul MDA este mai mare in formele severe si ramane crescut in cazul progresiunii

O2- din neutrofilele circulante are rol important in progresiunea pancreatitei acute ac.ascorbic-AO plasmatic de prima linie fata de SRO eliberate din PMN administrarea NAC scade amploarea complicatiilor (Braganza s.c. 1986)
NO in pancreatita acuta
NO endogen stimuleaza secretia enzimelor pencreatice de catre cel. acinare- eliberere crescuta prin iNOS indusa de mediatorii inflamatiei-Lpx. citotoxicitate pentru cel. acinare vasodilatatie periferica excesiva hipotensiune marcata administrarea NO amelioreaza edemul, tulburarile microcirculatorii (tes.hipoxic si PMN -surse de SRO)
NO epurator al O2-
impiedica aderenta PMN si Tr la endoteliul vascular
imbunatateste perfuzia pancreatica
Fenomen”doza-efect”-productia crescuta de NO determina leziuni tisulare prin cresterea generarii de O2- in PMN
Pancreatita cronica concentratii crescute de MDA in tesutul pancreatic, bila si ser la bolnavi cu pancreatita cronica alcoolica (Braganza 1983) concentratii mai mari ale SRO decat in pancreatita acuta prin SO prelungit datorat consumului cronic de alcool subnutritie, maldigestie, malabsorbtie de vit.E, C, Se deficitul cel mai mare de Seleniu prin nevoi crescute datorate SO prin etanol (Van Gossum s.c. 1996) suplimentarea alimentara cu Se, vit.C,E, metionina, scade frecventa recidivelor si intensitatea durerilor abdominale administrarea de alopurinol reduce durerea la 57% vs. 7% la cei care utilizeaza numai analgezice
Tratamentul AO in pancreatita acuta
SOD
7-10 zile I.m. disparitia durerii si scaderea amilazemiei
Alopurinol inhiba XO-actiune profilactica experimentala
Ebselen compus organic, administrat precoce (< 20 ore) la soareci
Ac.octadecil-ascorbic produs organic cu T/2 prelungit si Gm foarte mica-penetreaza transmembranal rapid
Blocanti de Ca atenueaza sechelele SO in pancreatita acuta (Closa s.c. 1996)
Lazaroizi la cc. mici au efect AO
Tratamentul AO in pancreatita acuta
PGE2 stabilizator membranar-previne eliberarea enzimelor proteolitice responsabile de conversia XDH in XO
Melatonina epureaza SRO si SRN, stimuleaza enzimele AO (SOD, GSH-Px) si inhiba iNOS
Gm mica, T/2 prelungit, lipofilica
Pentoxifilina reduce TNF si Il-6 -scade niv.citokinelor si mortalitatea
Seleniul creste activitatea GSH-Px plasmatice, complexe de AO (Se, vit.A, C, E, Zn si Mg) au redus tratamentul TI, interventiile chirurgicale si mortalitatea
Zincul creste nivelul GSH si al metalotioneinei in pancreas ameliorare histologica si reducerea mortalitatii
NO si NOS in pancreatita acuta inhibitia NOS scade secretia pencreatica, edemul si permeabilitatea vasculara-efect pozitiv scade fluxul sanguin pancreatic, accentueaza inflamatia si influxul de PMN-efect negativ combatut prin donatori NO- L-arginina
NO in doze mici benefic in pancreatita usoara dozele mari induc pancreatita necrotica severa
AO in pancreatita cronica
Vit.C, E, ß-caroten, Se, metionina reduc reactivarile si durerea, mai ales in pancreatita cronica nelitiazica (Bilton s.c. 1994)
Alopurinol si dimetil-sulfoxid (DMSO)
4x50mg/zi alopurinol+ 4x500mg/zi DMSO in pancreatita recurenta alcoolica-disparitia durerilor la 12 ore 57% vs.17% la cei cu analgezice, 100% la 24 ore
in pancreatita autoimuna se asociaza cu glicocorticoizii